时间:01-18人气:25作者:雨夜梧桐
PCR预变性目的是让DNA模板完全解链,确保后续扩增高效进行。高温处理能破坏DNA双螺旋结构,释放单链模板,避免引物结合受阻。这一步还能灭活可能存在的DNA酶,保护模板完整性。整个过程只需几十秒,却直接影响实验成败。
预变性温度一般在95摄氏度左右,时间因模板类型而异。基因组DNA需要更充分处理,而质粒DNA可适当缩短。温度不足会导致解链不完全,产物量大幅下降。正确操作能提高扩增特异性,减少非特异性产物出现。
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