pcr退火温度设定多少合适呢

PCR退火温度一般设在50到65摄氏度之间，具体要看引物的长度和GC含量。引物短的话温度可以低些，长的话就得调高。温度太高产物会少，太低又容易非特异性结合。实验时建议先做个梯度测试，找出最合适的温度。

实际操作中，常用的是55到60摄氏度这个范围。如果引物设计得好，60摄氏度左右效果不错。遇到复杂模板时，可以适当降低几度。温度稳定很重要，波动超过2摄氏度就可能影响结果。每次实验前记得校准仪器，确保温度准确。