pcr未成功的因素是什么?

PCR未成功的常见因素包括模板质量差、引物设计不当、反应体系污染或酶活性不足。模板量太少或降解会导致扩增失败，引物特异性不强或退火温度不合适也会影响结果。反应体系中缓冲液浓度、镁离子浓度或dNTPs比例不合适，都可能让实验失败。

污染是PCR失败的另一大原因，比如样品间交叉污染或环境中引入杂质。酶的保存不当或过期也会降低扩增效率，反复冻融更会破坏酶活性。操作时移液不准或反应时间设置错误，同样会影响最终结果。